質(zhì)粒轉(zhuǎn)化的濃度一般是多少?
一般來說10~100ng都可以,不過其實我們真正做的時候就是不管濃度多大(濃度約在100ng/ul以上),都是取1ul的質(zhì)粒溶液,稀釋10倍,就是10ul,加入到100ul的感受態(tài)細胞里~每次都這樣做,沒有問題。
質(zhì)粒轉(zhuǎn)化的原理
質(zhì)粒轉(zhuǎn)化是一種常用的基因轉(zhuǎn)移技術(shù),利用細菌細胞膜上的蛋白質(zhì)將質(zhì)粒DNA轉(zhuǎn)移到宿主細胞中。這項技術(shù)經(jīng)常用于基因工程和分子生物學(xué)的研究。
質(zhì)粒被定義為能夠自主復(fù)制和轉(zhuǎn)移的DNA小分子。大多數(shù)質(zhì)粒存在于細菌中,它們是一種先天的基因轉(zhuǎn)移機制。質(zhì)粒轉(zhuǎn)化的原理是利用細菌的天然質(zhì)粒轉(zhuǎn)移過程,將外源DNA導(dǎo)入宿主細胞,并在宿主細胞中表達。